對(duì)于病死豬檢測(cè)ASFV樣本，OIE推薦的是脾臟、淋巴結(jié)、肺臟、扁桃體和腎臟，然而獲取這些樣本需要對(duì)病死豬進(jìn)行解剖，不僅費(fèi)事，而且容易污染環(huán)境，因此本文評(píng)估了腹股溝淋巴結(jié)作為檢測(cè)樣本的準(zhǔn)確性，如此做，采樣工作將在幾分鐘內(nèi)完成，同時(shí)不會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染。

評(píng)估結(jié)果表明，ASFV在腹股溝淋巴結(jié)與脾臟中的的病毒載量相近，同時(shí)對(duì)于感染ASFV強(qiáng)毒和中等毒力豬的具有極高的準(zhǔn)確性和敏感性（100%）。因此，用腹股溝淋巴結(jié)檢測(cè)ASFV是可行的，適用于商品場(chǎng)、母豬場(chǎng)以及屠宰場(chǎng)，或當(dāng)豬場(chǎng)不明原因的出現(xiàn)大規(guī)模死亡時(shí)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

腹股溝淋巴結(jié)的采樣方法如下：

實(shí)驗(yàn)過程

取4-5周齡的三元雜交豬，分別進(jìn)行試驗(yàn)。

一、試驗(yàn)1的3頭豬通過口鼻感染ASFv愛沙尼亞2014株，2ml病毒液每個(gè)鼻孔0.5ml，口服1ml，攻毒劑量為2×105 TCID50，攻毒后6天，試驗(yàn)組開始表現(xiàn)為高熱和精神沉郁。

二、試驗(yàn)2的4-18號(hào)豬，通過口鼻感染ASFv愛沙尼亞2014株，攻毒劑量為2×105 TCID50，試驗(yàn)豬在攻毒后4天出現(xiàn)發(fā)熱及精神沉郁等癥狀。在攻毒后7天，18號(hào)豬死亡。

三、試驗(yàn)3的19-20號(hào)豬，肌肉注射ASFV加納20株（2017年基因1型），每頭豬在后腿注射2ml，每條腿注射1ml，攻毒劑量為1×103TCID50。攻毒5天后，19-20號(hào)豬均出現(xiàn)高熱，昏昏欲睡，病情發(fā)展快速，有便血出現(xiàn)。攻毒后7天對(duì)兩頭豬安樂死。

四、試驗(yàn)4的21-22號(hào)豬，口鼻攻毒ASFv尼日利亞 RV502株3ml，這是2020年從尼日利亞分離到的基因2型非瘟強(qiáng)毒株。每頭豬攻毒2×105 TCID50，兩頭豬均在攻毒后4天出現(xiàn)高熱，糞便顆粒干燥、發(fā)黑，精神沉郁，攻毒后5天兩頭豬均出現(xiàn)直腸出血，21號(hào)在攻毒后6天死亡，22號(hào)也在同一天執(zhí)行安樂死。

五、試驗(yàn)5的23-25號(hào)豬，口鼻感染越南ASFV 2561株2.8ml，每頭豬攻毒2×105 TCID50。

六、試驗(yàn)6的26-44號(hào)豬，肌肉注射ASFV格魯吉亞2007株1ml，攻毒劑量為1×103TCID50。用于評(píng)估口腔液樣本。

1、脾臟和腹股溝淋巴結(jié)中的ASFV病毒載量，發(fā)現(xiàn)所有ASFV毒株之間均成正相關(guān)。

2、中等毒力和強(qiáng)毒株的相關(guān)性，脾臟樣本和腹股溝淋巴結(jié)的病毒載量仍然呈正相關(guān)，且差異極顯著。

3、感染中等毒力的ASFV愛沙尼亞2014豬的樣本，脾臟和腹股溝淋巴結(jié)的正相關(guān)程度最高。

將脾臟和腹股溝淋巴結(jié)ASFV平均病毒載量進(jìn)行比較時(shí)，脾臟樣本略高于腹股溝淋巴結(jié)，但是把所有樣本放到一起分析時(shí)，兩者之間統(tǒng)計(jì)學(xué)差異不顯著。

其中a、d是所有毒株的脾臟和腹股溝淋巴結(jié)病毒載量的相關(guān)性，b、e是愛沙尼亞毒株的脾臟和腹股溝淋巴結(jié)病毒載量的相關(guān)性，c、f是強(qiáng)毒株的脾臟和腹股溝淋巴結(jié)病毒載量的相關(guān)性。

將中等毒力的ASFV愛沙尼亞2014株的病毒載量單獨(dú)分析，樣品間并沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在感染ASFV強(qiáng)毒株中，脾臟樣品的病毒載量最高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但是脾臟與腹股溝淋巴結(jié)的ASFV載量的差異較小。

拋開所有，無論病毒載量高低和差異顯著與否，在全血和脾臟樣本中檢測(cè)到ASFV的樣本，在腹股溝淋巴結(jié)中的也同樣能夠檢出，表明該方法可行。